従来の「Native PAGE」は、タンパク質自身が持っている電荷に従って電気泳動する手法でしたが、プラス電荷を帯びているタンパク質はゲルに入らなかったり、分子量よりも高い位置に検出されるなどの難点がありました。この難点を解決したのがBlue Native PAGEです。この手法では、タンパク質をCoomassie Blue G-250に結合させることで均一にマイナスに荷電させ、かつNativeの状態を保ったまま泳動ができます。
名前のとおり真っ青なバッファーを使用しますが、実験のコツやポイントを学んでおけばご心配は不要です。このハンズオントレーニングでは、Blue Native PAGEの原理や基礎、条件検討の考え方、ハンドリングの注意点を学びながら、タンパク質抽出や定量、電気泳動、さらにCBB染色やメンブレンへの転写方法などが体験できます。

• これからBlue Native PAGEを実施する方、Native PAGEなどの電気泳動を現在実施されている方

9:30～16:00

• Blue Native PAGEの原理、概要
• Blue Native PAGE実験の流れとコツ
• 転写、染色時に気を付けるポイント
• Blue Native PAGE後のウェスタンブロッティングと二次元電気泳動

• タンパク質抽出、タンパク質定量
• プレキャストゲルを用いたBlue Native PAGE
• Native PAGEからの転写
• CBB染色、サンプル中の酵素の検出

※適宜、休憩をはさみながら進行いたします。
※状況によりスケジュールが前後することがございます。